El kit de amplificación rápida isotérmica de ADN de Mira utiliza tecnología avanzada de amplificación de ácido nucleico a temperatura ambiente y una temperatura constante (típicamente de 39ºC a 42ºC). Con la asistencia de proteínas auxiliares y proteínas de unión de cadena única, la recombinasa y los cebadores forman un complejo que busca y se une al dominio de homología objetivo. Esto da como resultado la formación de una región D-Loop en el sitio homólogo, iniciando el intercambio de hilos. A medida que la recombinasa se disocia del complejo, la polimerasa se une al extremo 3 'del cebador, comenzando el proceso de extensión de la cadena. Además, al aprovechar la actividad de la exonucleasa, el kit utiliza sondas moleculares específicas diseñadas para la plantilla, lo que permite el monitoreo en tiempo real del proceso de amplificación de fragmentos objetivo a través del equipo de detección de fluorescencia.
【Características】
Alta sensibilidad
El kit ofrece una excelente sensibilidad y especificidad para la amplificación del ácido nucleico.
Tiempo de reacción rápido
El proceso de amplificación lleva solo 20 minutos, proporcionando resultados rápidos.
Almacenamiento y manejo convenientes
Los componentes de reacción están en forma de polvo seco, fáciles de almacenar y manejar.
Amplia compatibilidad
Compatible con varios instrumentos de PCR cuantitativos de fluorescencia, sistemas de amplificación de fluorescencia de temperatura constante.
【Diseño de imprimación】
Para un rendimiento óptimo, los cebadores deben tener 30-35 BP de longitud. Los cebadores cortos pueden reducir la velocidad de amplificación y la sensibilidad de detección. Los diseños de cebadores deben evitar estructuras secundarias que puedan impedir la amplificación. La longitud de amplicón recomendada es 150-300 bp.
【Diseño de sonda fluorescente】
La sonda fluorescente no debe superponerse con el sitio de reconocimiento de cebadores específico. Debe tener 46-52 nt de longitud, evitando secuencias palindrómicas, estructuras secundarias internas y bases repetidas continuas. El diseño de la sonda incluye cuatro sitios de modificación:
- A dspacer(tetrahydrofuran, thf) a aproximadamente 30-35 nt desde el extremo 5 ', actuando como un sitio de reconocimiento para la exonucleasa.
- A grupo fluorescenteestá etiquetado aguas arriba del sitio THF.
- A grupo de enfriamientose coloca aguas abajo, 2-4 nt aparte del grupo fluorescente.
- El extremo de 3 'de la sonda está etiquetado con ungrupo de bloqueo(por ejemplo, un grupo de amina, grupo fosfato o espaciador C 3-), con THF aproximadamente a 15 nt del extremo 3 '.
【Composición del kit】
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Comitir |
CA pesar de que la mayoría de las personas |
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Un amortiguador |
1.6ml × 1 tubo |
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B búfer |
150μl × 1 tubo |
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Pplantilla de control ositivo |
100μl × 1 tubo |
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Pcontrol ositivosonda ycebador MIx |
70μl × 1 tubo |
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Reactivo |
48T |
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Manual de guía |
1 copia |
【Especificaciones de embalaje】
- Especificaciones: 48 T/Pack
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